Визначення рибофлавіну в драже «Ревіт» за допомогою високоефективної рідинної хроматографії

Abstract

Мета роботи – розроблення експресної, вибіркової, відтворюваної методики визначення рибофлавіну за допомогою високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) у полівітамінному препараті – драже «Ревіт». Матеріали та методи. Застосували дегазатор, бінарний насос, автосамплер, термостат колонки, діодно-матричний детектор (Agilent Technologies, Germany); колонку хроматографічну Zorbax SB-C18, 30 мм × 4,6 мм, 1,8 мкм. Підготовку зразків здійснили за допомогою ваг аналітичних електронних Kern ABT 100-5M, ультразвукової бані Ultrasonic XUBA 3, ультрафільтрів нейлонових 0,12 мкм. Результати. Як буферний розчин в елюенті обрали 0,1 % мурашину кислоту. Встановили максимальне значення logD інтервалі для рибофлавіну при pH 2–4. Тому максимальне утримання рибофлавіну спостерігали при використанні елюенту, рН якого відповідає цьому інтервалу. Значення рН для 0,1 % розчину мурашиної кислоти дорівнює 2,7, тому такий буфер обрали в складі елюенту. Як органічний модифікатор взяли ацетонітрил. Оптимальне утримання сполуки спостерігали при 10 % ацетонітрилу. Висновки. Вивчили хроматографічну поведінку рибофлавіну на підставі хіміко-аналітичних властивостей. Встановили оптимальні умови хроматографічного визначення та розробили специфічну, експресну методику визначення рибофлавіну в драже «Ревіт». Опрацювали методику на реальному зразку драже «Ревіт». Методику рекомендовано для використання в роботі контрольно-аналітичних і дослідних лабораторій. The aim of the work is development of express, selective, reproducible methods for the determination of riboflavin by HPLC in a multivitamin preparation, dragee “Revit”. Materials and methods. Degasser, binary pump, autosampler, thermostated column compartment, diode array detector. Chromatographic column Zorbax SB-C18, 30 mm × 4.6 mm, 1.8 μm. Samples were prepared using analytical electronic scales Kern ABT 100-5M, ultrasonic bath Ultrasonic XUBA 3, nylon ultrafilters 0.12 μm. Results. 0.1 % formic acid was selected as a buffer solution in the eluent. The maximum values of logD were observed at intervals for riboflavin at pH from 2 to 4. Therefore, the maximum retention of the riboflavin was observed when using the eluent, рН which corresponds to this interval. The pH value for 0.1 % formic acid solution was 2.7. Therefore, such a buffer was chosen by us as part of the eluent. Acetonitrile was selected as the organic modifier. The optimal content of the compound was observed at 10 % acetonitrile. Conclusions. The chromatographic behavior of riboflavin on the basis of chemical-analytical properties was studied. The optimal conditions for chromatographic determination were determined and a specific, express method for the determination of riboflavin in “Revit” dragee was developed. The technique on a real sample of “Revit” dragee was elaborated. The method was recommended for use in control and analytical and research laboratories.