Динаміка с-kit імунопозитивних бета-клітин підшлункової залози при екзогенних впливах та ендогенно сформованій патології

Abstract

Мета роботи – визначення динаміки проліферативного фактора с-kit у бета-клітинах при екзогенному впливі (переривчаста гіпоксична гіпоксія) та ендогенно сформованій патології (артеріальна гіпертензія та цукровий діабет). Матеріали і методи. Дослідження здійснили на 15 білих щурах лінії Вістар і 5 щурах лінії SHR, яких поділили на 4 групи (по 5 особин у кожній). Перша група тварин – контрольна (інтактна); другу групу сформували особини з експериментальним цукровим діабетом; третю – щури лінії SHR зі спадковою артеріальною гіпертензією; тварини четвертої групи зазнали впливу переривчастої гіпоксичної гіпоксії. Після виведення тварин з експерименту, забору й обробки органів депарафінували та демаскували серійні гістологічні зрізи підшлункової залози завтовшки 5 мкм. Інсулін і маркер прогеніторних клітин с-kit у бета-клітинах виявляли імунофлуоресцентним методом за допомогою антитіл. Імунофлуоресцентну реакцію вивчали на флуоресцентному мікроскопі AxioImager-M2. Результати. Кількісний показник бета-клітин у щурів із цукровим діабетом знизився майже вшестеро. Концентрація інсуліну у тварин цієї групи підвищилася порівняно з показником інтактних тварин, а маркер проліферативної активності знизився, при цьому відсотковий вміст с-kit-імунопозитивних бета-клітин не змінився. Перебіг спадкової артеріальної гіпертензії у щурів лінії SHR супроводжувався зменшенням у 8 разів кількості бета-клітин на 1 см2, підвищенням рівня інсуліну в бета-клітинах щодо показника й інтактної групи, і тварин з експериментальним цукровим діабетом. Концентрація с-kit у бета-клітинах вірогідно знижена тільки щодо групи інтактних тварин; кількість с-kit-імунопозитивних бета-клітин знизилася майже в 2,8 раза. The aim of the work is to determine the dynamics of c-kit proliferative factor in beta cells under an exogenous influence (intermittent hypoxic hypoxia) and endogenous pathology (arterial hypertension and diabetes mellitus). Materials and methods. The study was conducted using 15 white Wistar rats and 5 spontaneously hypertensive rats (SHR), which were divided into 4 groups of 5 animals each. Group 1 – control (intact) rats, group 2 – animals with experimental diabetes mellitus, group 3 – rats with hereditary arterial hypertension (SHR), group 4 – animals exposed to the effect of intermittent hypoxic hypoxia. At the end of the experiment, the animals were euthanized, organs were harvested and processed, serial histological pancreatic sections 5 μm thick were deparaffinized and retrieved. Insulin and c-kit+ beta progenitor cells were detected by the immunofluorescence method using antibodies. Immunofluorescent reactions were studied using an AxioImager-M2 fluorescence microscope. Results. The quantitative indicator of beta cells was almost 6 times decreased in rats with diabetes mellitus. Concentrations of insulin in animals of this group were increased compared to intact animals and the marker of proliferative activity was decreased without changes in the percentage of c-kit-immunopositive beta cells. The course of hereditary arterial hypertension in SHR was accompanied by an 8-fold decrease in the number of beta cells per 1 cm2, an increase in insulin in beta cells as compared to the animals of both intact and experimental diabetes groups. Regarding the c-kit expression in beta cells, it was significantly reduced only in the group of intact animals and the number of c-kit-immunopositive beta cells was almost 2.8 times decreased.