Характеристика групи генів із низьким рівнем експресії в підшлунковій залозі щурів за умов впливу багатоденної переривчастої гіпоксії

Abstract

Мета роботи – визначити особливості групи генів із низьким рівнем експресії, пов’язаних із гіпоксією, у підшлунковій залозі щурів лінії Вістар за умов впливу переривчастої гіпоксії. Матеріали і методи. Дослідження здійснили на 10 білих статевозрілих щурах лінії Вістар, яких поділили на 2 групи (по 5 тварин у кожній). Тварини 1 групи – контрольні (інтактні). Щурам 2 групи проводили гіпоксичні тренування протягом 15 днів по 6 годин щоденно: на 1–5 день в умовах барокамери імітували підйом на висоту від одного до п’яти кілометрів над рівнем моря, а останні 10 днів – 6 км над рівнем моря. Для аналізу експресії генів використали метод полімеразної ланцюгової реакції зі зворотною транскрипцією в режимі реального часу (ПЛР) CFX-96 Touch™ (Bio-Rad, США) та набір RT2 Profiler™ PCR Array Rat Hypoxia Signaling Pathway (QIAGEN, Німеччина), де об’єктом дослідження в експериментальних тварин були 84 гени. Результати. У результаті ПЛР-дослідження генів у зразках підшлункової залози інтактних тварин і щурів, які зазнали впливу гіпоксичних тренувань, встановлено: серед 84 генів, пов’язаних із гіпоксією, виявлено групу з 5 генів із низьким рівнем експресії (ΔΔCт < 30). До цього патерну належать гени Bhlhe40, Ctsa, Hif1a, Lox та Slc16a3, експресія яких статистично знижена. Так, порівняно з рівнем експресії в інтактних тварин, експресія Bhlhe40 зменшилася в 2,59 раза, Ctsa – в 6,02 раза, Hif1a – в 3,85 раза, Lox – в 3,01 раза, Slc16a3 – в 2,40 раза. The aim of the study is to determine the features of a group of genes with low expression level, associated with hypoxia in the pancreas of Wistar rats under conditions of intermittent hypoxia. Materials and methods. The study was conducted on 10 white, sexually mature Wistar rats, which were divided into 2 groups (5 animals in each). Animals of group 1 were part of the control (intact) group. The animals of the 2nd group were subjected to hypoxic training according to the following scheme: for 15 days, 6 hours daily, namely on days 1–5 they simulated an ascent to a height of one to five kilometers above sea level under the conditions of a barometer, and the last 10 days 6 km above the sea level. To analyze gene expression, we used the polymerase chain reaction method with real-time reverse transcription (PCR) CFX- 96 Touch™ (Bio-Rad, USA) and the RT2 Profiler™ PCR Array Rat Hypoxia Signaling Pathway kit (QIAGEN, Germany), where 84 genes were the subject of research in experimental animals. Results. According to the results of the PCR study of genes in the pancreas samples of intact animals and animals exposed to hypoxic training, it was established that out of 84 genes associated with hypoxia, a group of 5 genes with a low expression level (ΔΔCt < 30) was found. This pattern includes Bhlhe40 genes, Ctsa, Hif1a, Lox, and Slc16a3, the expression of which is statistically reduced. Thus, compared to the level of their expression in intact animals, the expression of Bhlhe40 decreased by 2.59 times, Ctsa by 6.02 times, Hif1a by 3.85 times, Lox by 3.01 times, and Slc16a3 by 2.40 times.